elisa試劑盒實驗固相載體的挑選▩•↟：很多物質可作為固相載體◕✘·▩₪，如聚氯乙烯▩•▩✘•、聚苯乙烯▩•▩✘•、聚丙醯胺和纖維素等↟◕·。
包被抗體（或抗原）的挑選▩•↟：將抗體（或抗原）吸附在固相載體外表時◕✘·▩₪，請求純度要好,吸附時一般請求PH在9.0～9.6之間↟◕·。吸附溫度◕✘·▩₪，時刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃18～24小時↟◕·。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌效果◕✘·▩₪，應留意防護↟◕·。其方式可所以凹孔平板▩•▩✘•、試管▩•▩✘•、珠粒等↟◕·。現在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板↟◕·。不論何種載體◕✘·▩₪，在運用前均可進行篩選▩•↟：用等量抗原包被◕✘·▩₪，在同一實驗條件下進行反響◕✘·▩₪，調查其顯色反響是不是均一性◕✘·▩₪，據此判明其吸附效能是不是傑出↟◕·。正式實驗時◕✘·▩₪，應別離以陽性對照與陰性對照操控實驗條件◕✘·▩₪，待檢樣品應作一式二份◕✘·▩₪，以確保實驗成果的性↟◕·。
在ELISA中◕✘·▩₪，進行各項實驗條件的挑選是很主要的◕✘·▩₪，其間包含:
有條件者應運用不致癌▩•▩✘•、靈敏度高的供氫體◕✘·▩₪，如TMB和ABTS是現在較為滿足的供氫體↟◕·。底物效果一段時刻後◕✘·▩₪，應參加強酸或強鹼以停止反響↟◕·。一般底物效果時刻◕✘·▩₪，以10-30分鐘為宜↟◕·。底物運用液必須新鮮製造◕✘·▩₪，尤其是H2O2在臨用前參加↟◕·。然後再固定其它條件或採納“方陣法”（包被物▩•▩✘•、待檢樣品的參閱品及酶符號抗體別離為不一樣的稀釋度）在正式實驗體系裡地滴定其作業濃度↟◕·。有時本底較高◕✘·▩₪，闡明有非特異性反響◕✘·▩₪，可選用羊血清▩•▩✘•、兔血清或BSA等封閉↟◕·。酶的底物及供氫體的挑選▩•↟：對供氫體的挑選請求是價廉▩•▩✘•、安全▩•▩✘•、有明顯地顯色反響◕✘·▩₪，而自身無色↟◕·。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定▩•↟：即用不一樣的蛋白質濃度（0.1▩•▩✘•、1.0和10μg/ml等）進行包被後◕✘·▩₪，在其它實驗條件相同時◕✘·▩₪，調查陽性標本的OD值↟◕·。挑選OD值zui大而蛋白量起碼的濃度↟◕·。關於多數蛋白質來說一般為1～10μg/ml↟◕·。
