ELISA是免疫診斷中的以固相酶聯免疫反應為基礎的一項技術│▩,在抗原抗體檢測及病原體檢測方面得到了廣泛的應用│▩,在臨床及科研應用上具有重要的意義↟☁▩。elisa方法檢測具有靈敏度高│╃╃·、特異性強│╃╃·、操作簡單│╃╃·、樣本量少等特點│▩,無需特殊儀器│▩,可手工操作│▩,也可全自動化檢測│▩,且檢測結果準確度高│▩,重複性好↟☁▩。
由於檢測的樣本量大│▩,它不僅適用於臨床標本的檢查│▩,還適合於血清流行病學篩查↟☁▩。ELISA根據其檢測原理的不同│▩,可分為競爭法│▩,間接法│▩,夾心法│▩,捕獲法等│▩,不僅可檢測大分子物質│▩,也可檢測低分子量的激素及小分子病原體↟☁▩。
ELISA可檢測樣本多樣│▩,包括血清│▩,血漿│▩,細胞培養液│▩,尿液│▩,糞便│▩,唾液│▩,腦脊液│▩,細胞裂解液│▩,組織提取物等│▩,可用於各樣本體外定性或定量的測定↟☁▩。
為了確保ELISA測定的特異性│▩,洗板可清除非特異性結合物質│▩,減少背景訊號│▩,增加分析的信噪比↟☁▩。
手工洗板時│▩,拍板要垂直│▩,避免交叉汙染│▩,用力不能過猛│▩,防止抗原抗體複合物脫離↟☁▩。使用半自動洗板時│▩,應經常檢查沖洗頭是否通暢│▩,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出↟☁▩。為了達到較好的洗滌效果│▩,實驗室可採用機器與人工洗滌相結合的方法│▩,即在機器洗滌後再進行人工洗板1-2次↟☁▩。
以HRP作為標記酶的ELISA試劑盒中使用的洗板液一般為含0.05%Tween20的中性PBS│▩,其中│▩,吐溫20的濃度可在0.05%-0.2%之間│▩,高於0.2%時│▩,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低實驗的靈敏度↟☁▩。